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分光光度計(jì)檢定中應(yīng)注意的問題

JJG178-2007《紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)》檢定規(guī)程將 JJG178-1996《可見分光光度計(jì)》、JJG375-1996《單光束紫外-可見分光光度計(jì)》、JJG682-1990《雙光束紫外可見分光光度計(jì)》、JJG689-1990《紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)》4個(gè)規(guī)程合并為一個(gè)規(guī)程。合并工作主要從與建議接軌、適應(yīng)現(xiàn)代化儀器發(fā)展的需要、減少規(guī)程數(shù)量、易于操作等方面出發(fā)，對(duì) 4個(gè)規(guī)程的檢測(cè)方法、指標(biāo)要求、操作步驟等進(jìn)行了整合。合并后的新規(guī)程涵蓋了所有類型分光光度計(jì)檢定的有關(guān)事項(xiàng)及計(jì)量技術(shù)指標(biāo)，其較全面、詳盡的規(guī)定了檢定的有關(guān)內(nèi)容。針對(duì)一些環(huán)境條件好，操作人員素質(zhì)高的單位，檢定員按規(guī)程檢定，一般不會(huì)有問題，但對(duì)一些廠礦企業(yè)，或在儀器使用環(huán)境較差、人員素質(zhì)普遍較低的情況下，檢定人員應(yīng)注意一些問題。

1 檢定前，應(yīng)粗略檢查儀器波長(zhǎng)

分光光度計(jì)分析測(cè)量原理基于朗伯-比爾定律，其數(shù)學(xué)

表達(dá)式為 A =-1g(I/I0)= KLC

式中： A —物質(zhì)的吸光度；I —透射的單色光強(qiáng)度；

I0—入射的單色光強(qiáng)度；K —物質(zhì)的吸光系數(shù)；L —被分析物

質(zhì)的光程；C —物質(zhì)濃度。

朗伯-比爾定律適用的前提條件是單色光。從上式中可以看出，波長(zhǎng)變化，將直接影響吸光度及物質(zhì)濃度的變化。

由此可見，光的波長(zhǎng)示值誤差在分光光度計(jì)檢定與使用中的

重要性。針對(duì)某些廠礦企業(yè)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件差、儀器使用頻

繁、易搬動(dòng)、易出現(xiàn)故障的情況，檢定前，應(yīng)先粗略檢查儀

器的光路，若無大問題，可進(jìn)一步按照規(guī)程進(jìn)行檢定，若不

符要求，可調(diào)試后再檢定，這樣可以提高工作效率，達(dá)到事

半功倍的效果。具體方法如下：

將儀器波長(zhǎng)置于 580nm處，狹縫置于 2nm處，開啟鎢燈電源開關(guān)，打開試樣室蓋，用一張白紙插入?yún)⒈裙饴坊驑悠饭饴分醒耄瑧?yīng)在白紙上看到一個(gè)清晰、明亮、完整的橙黃色光斑，再打開氫燈，與上述方法一致，應(yīng)看到一個(gè)亮度較暗的橙黃色光斑，當(dāng)手調(diào)波長(zhǎng)至長(zhǎng)波方向時(shí)，應(yīng)看到光斑顏色由黃變紅，接著當(dāng)手調(diào)波長(zhǎng)至短波方向時(shí)，應(yīng)看到光斑顏色由紅變黃并向紫色變化。若儀器波長(zhǎng)檢測(cè)能順利完成，則說明儀器光學(xué)系統(tǒng)基本正常，波長(zhǎng)示值誤差在 2nm范圍以內(nèi)。

 2 儀器波長(zhǎng)調(diào)整后，一定要告知對(duì)方操作員

在定量分析中，許多企業(yè)的一線分析仍是采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。它是基于求得一組標(biāo)準(zhǔn)溶液所對(duì)應(yīng)的吸光度與被測(cè)樣品的吸光度進(jìn)行比較，而得到被測(cè)物含量的一種方法，也是zui經(jīng)典的方法。在檢定中，如果發(fā)現(xiàn)儀器波長(zhǎng)示值誤差，經(jīng)調(diào)整后，儀器各項(xiàng)計(jì)量指標(biāo)均符合 JJG178-2007的要求，檢定人員應(yīng)告知對(duì)方使用人員重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，否則檢測(cè)結(jié)果將出現(xiàn)較大偏差。因?yàn)樵瓨?biāo)準(zhǔn)曲線是在波長(zhǎng)調(diào)整前繪制的，現(xiàn)在波長(zhǎng)調(diào)整了，與原來相比吸光度將隨之發(fā)生變化，因此

需要從新配置系列標(biāo)準(zhǔn)曲線，繪制新的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 3 分光光度計(jì)透射比檢定過程中應(yīng)注意的問題

分光光度計(jì)的透射比在檢定過程中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)透射比示值超出規(guī)程要求的情況，那么這種狀況由何而起呢，經(jīng)過多年的經(jīng)驗(yàn)，認(rèn)為分光光度計(jì)透射比準(zhǔn)確度示值誤差超差的原因大致如下：

3.1 波長(zhǎng)示值誤差超差

在檢測(cè)儀器時(shí)一般先進(jìn)行波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的檢定，按要求將儀器波長(zhǎng)調(diào)至合格，再進(jìn)行透射比檢測(cè)即可解決波長(zhǎng)示值誤差超差問題。

3.2 檢測(cè)器光門桿組件損壞

有些儀器在合上檢測(cè)室蓋板后，利用蓋板打開檢測(cè)器光門，長(zhǎng)時(shí)間使用后會(huì)使光門組件損壞，使光門處于半開和狀態(tài)，用手輕壓蓋板，儀器示值會(huì)發(fā)生明顯變化，由于光門位置開合的不重復(fù)性導(dǎo)致透射比示值的重復(fù)性超差。此時(shí)對(duì)光門組件進(jìn)行調(diào)整使光門能夠*打開，問題即可解決。

3.3 光源的光譜帶寬發(fā)生變化

分光光度計(jì)要求必須是一定的單色光，且每種儀器都應(yīng)具有一定的光譜帶寬。一些儀器在使用或修理的過程中，有些非專業(yè)人員可能會(huì)誤對(duì)儀器的出射狹縫進(jìn)行調(diào)整，從而導(dǎo)致儀器的光源單色性純度不夠，影響到儀器的透射比準(zhǔn)確度。

遇到這類問題，檢測(cè)人員應(yīng)與儀器的使用人員進(jìn)行必要的溝通，詢問儀器的使用或修理過程，然后按照儀器的技術(shù)參數(shù)對(duì)狹縫進(jìn)行重新調(diào)整，直到光譜帶寬符合要求為止。

3.4 檢測(cè)器的光電線性度不夠

儀器要求檢測(cè)器具有一定的光照線性范圍，但是，檢測(cè)器在使用中會(huì)出現(xiàn)鈍化現(xiàn)象，用的越久現(xiàn)象越嚴(yán)重，在低透射比時(shí)正常，而在高透射比時(shí)會(huì)表現(xiàn)出明顯的超差。遇到這類問題只有更換檢測(cè)器。

3.5 儀器顯示裝置發(fā)生問題

對(duì)一些使用指示類表頭的儀器，由于指針軸長(zhǎng)期磨損使儀器靈敏度失靈，會(huì)發(fā)生卡滯現(xiàn)象，死區(qū)增大，手指輕敲，指針還會(huì)發(fā)生相應(yīng)偏移。遇到這類問題只有更換新的表頭。

3.6 比色皿架位置發(fā)生偏移

比色皿架在工作中經(jīng)常運(yùn)動(dòng)，發(fā)生位置偏差時(shí)光束不能*透過比色皿射入檢測(cè)器，而射在比色皿的邊緣部位，導(dǎo)致有效光能損失而使透射比失準(zhǔn)。此時(shí)可對(duì)比色皿架底座的前后位置進(jìn)行調(diào)整，使光束正好從比色皿架中央通過即可。

3.7 比色皿使用不當(dāng)

在對(duì)分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，要注意空白的石英比色皿在紫外區(qū)沒有吸收（或吸收較小），而玻璃比色皿在紫外去吸收較大，如果錯(cuò)拿，則會(huì)給分析結(jié)果帶來粗大測(cè)量誤差。

另外，檢定人員也不要忽略對(duì)儀器配套使用的比色皿成套性的檢定，這也是造成儀器分析結(jié)果偏離的一個(gè)重要因素。主要是由于操作人員用于盛放參比溶液和樣品溶液的比色皿基本固定不變，從而造成盛放樣品的比色皿由于污染程度相對(duì)嚴(yán)重而使比色皿顏色變深，久而久之，兩個(gè)比色皿透射比出現(xiàn)較大誤差。對(duì)于這種情況，應(yīng)告知操作人員，比色皿位置并非固定不變，可前后互置，并經(jīng)常清洗，保證其成套性

誤差在 0.5%以內(nèi)方可成套使用。

綜上所述，只是筆者作為檢定員在檢定過程中一些經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)。當(dāng)然，作為一名檢定員不僅應(yīng)該透徹了解檢定規(guī)程的每一條款，熟練操作儀器，還要多學(xué)習(xí)一些與分析相關(guān)的基本知識(shí)技能以及理論。這樣，在實(shí)際工作中才能更好的服務(wù)企業(yè)，幫助企業(yè)解決實(shí)際困難。